化学生物学实验
节选
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《化学生物学实验》： 改变凝胶浓度和交联度，可获得不同孔径、密度、黏度、弹性以及机械强度的凝胶，以适应各种样品的分离。 聚丙烯酰胺凝胶可以分为变性和非变性两种，其中变性胶包括十二烷基硫酸钠（SDS）PAGE和尿素—PAGE两种。前者用于分离蛋白质，后者用于分离核酸。非变性凝胶电泳过程中，蛋白质和核酸保持原来的结构状态，并根据相对分子质量、电荷与空间结构逐级分离。但是非变性PAGE得到的电泳谱图往往包括非常复杂的结构信息，不容易判断和分辨，于是发展了变陛PAGE技术。其中，SDS—PAGE在测定蛋白质相对分子质量信息方面应用非常广泛。SDS是一种阴离子表面活性剂，它能够断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二、三级结构。在样品和凝胶中加人SDS以及还原剂（巯基乙醇）后，蛋白质分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白质—SDS胶束，所带的负电荷大大超过了蛋白质胶束原有的电荷量，消除了不同分子间的电荷差异和结构差异对电泳迁移率的影响，使得蛋白质的电泳迁移主要取决于相对分子质量，因此SDS—PAGE是有效的测定蛋白质相对分子质量的方法。为了保证蛋白质与SDS的充分结合，它们的质量比通常为1：4或1：3。在聚丙烯酰胺凝胶中加入6～8mol·L—1尿素，就可使得核酸（DNA和RNA）变性，破坏其二级结构，因此其电泳迁移率主要由碱基个数决定，用于分离不同长度的核酸。该方法对核酸的*高分辨率可达单个碱基。 ……
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本书特色
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内容简介
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本书共8章, 第1、2章介绍了化学生物学实验基本知识和基本操作。第3-7章是实验部分, 共编写41个实验, 包括生化分离分析实验技术、生物材料制备实验技术等。第8章附录介绍了15类化学生物学实验常用仪器的使用方法, 特殊试剂的配制等重要资料。
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目录
前言第1章 化学生物学实验基本知识1.1 实验室规则及须知1.2 实验室安全及防护知识1.2.1 防生物源性危害的基本措施1.2.2 放射性和紫外线辐射的危害和防护1.2.3 特殊化学生物学试剂的安全使用与储存1.2.4 化学生物学实验室废弃物的处理第2章 化学生物学实验基本操作2.1 常用仪器的洗涤与清洁2.1.1 玻璃器皿的清洗2.1.2 其他材质器皿的清洗2.1.3 铬酸洗液的配制方法和使用注意事项2.1.4 其他常用的洗液2.2 常用消毒灭菌方法2.2.1 物理消毒灭菌方法2.2.2 化学消毒灭菌方法2.3 离心技术2.3.1 离心技术的原理2.3.2 离心机的类型和转头的分类2.3.3 常用离心方法2.4 常用层析技术2.4.1 凝胶层析2.4.2 离子交换层析2.4.3 亲和层析2.4.4 疏水层析2.5 电泳技术2.5.1 基本原理2.5.2 琼脂糖凝胶电泳2.5.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳2.5.4 等电聚焦电泳2.5.5 二维电泳2.5.6 毛细管电泳2.5.7 凝胶成像技术2.6 PCR技术2.6.1 PCR技术简介2.6.2 PCR技术的基本原理和过程2.6.3 PCR反应的五个元素2.7 DNA测序技术2.8 细胞培养技术2.8.1 体外培养细胞的分类2.8.2 培养细胞的生长和增殖过程2.8.3 原代培养2.8.4 传代培养2.8.5 细胞的冻存与复苏2.9 化学生物学样品制备、纯化、浓缩和干燥2.9.1 材料的选取和前处理2.9.2 细胞的破碎2.9.3 蛋白质的提取和纯化2.9.4 核酸的提取和纯化2.9.5 样品的浓缩和干燥第3章 生化分离分析实验技术实验1疏水作用色谱分离纯化a一淀粉酶实验2亲和层析树脂的制备及溶菌酶的提取纯化实验3香菇多糖的提取、纯化及总糖含量测定实验4青霉素酰化酶米氏常数和反应活性的测定实验5静电自组装构筑HRP多层膜电极检测酚类物质研究实验6表面等离子光谱生物传感器研究抗原与抗体的相互作用实验7FRET法及荧光猝灭法测定蛋白酶的活性第4章 生物材料制备实验技术实验8生物矿物和生物矿化——碳酸钙多形的控制与制备实验9无定形碳酸钙的制备和转化实验10硫酸链霉素肺靶向明胶微球的制备及含量测定实验11聚乙烯亚胺一DNA复合物粒径的测定实验12聚乙烯亚胺一阿霉素共聚物的合成实验13复凝聚法制备阿霉素微囊及细胞毒性评价实验14盐酸左氧氟沙星不同晶形的制备及其表征第5章 化学中基因工程实验技术实验15质粒DNA的提取与纯化实验16大肠杆菌感受态细胞制备与质粒DNA的转化实验17琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段实验18PCR基因扩增获取毛囊DNA及其分离实验19植物组织中基因组DNA的提取与扩增实验20PCR_RFLP法检测单核苷酸多态性实验2l基于连接反应的滚环扩增技术检测单核苷酸多态性实验22枯草杆菌脂肪酶A的基因克隆第6章 化学中蛋白质工程实验技术实验23酰化酶催化4-硝基咪唑的Markovnikov加成反应实验242′-脱氧尿苷衍生物的酶促合成的选择性调控实验25酶催化Michael加成反应实验26Novozyrn435催化的1-位芳基取代的末端炔丙醇动力学拆分反应实验27金属卟啉模拟的生物氧化过程实验28泛素蛋白的操控式分子动力学模拟实验29纤连蛋白在羟磷灰石上吸附一脱附过程的分子模拟第7章 化学中细胞工程实验技术实验30动物细胞的培养实验31MTT法测定聚乙烯亚胺的细胞毒性实验32抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞的抑制及细胞形态观察实验33ATP生物荧光药敏检测技术检测5一氟尿嘧啶对卵巢癌细胞的药敏实验实验34抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶对肿瘤细胞迁移的影响实验35聚乙烯亚胺-DNA复合物的制备和体外细胞转染实验实验36聚乙烯亚胺携带基因在细胞中的荧光染色实验实验37聚乙烯亚胺作为基因载体材料携带TRAIL基因对细胞凋亡的影响实验38聚乙烯亚胺一阿霉素聚合物的细胞摄取实验实验39硫酸氢氯吡格雷对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖影响实验40喹诺酮类药物盐酸左氧氟沙星的抑菌实验实验4l聚乙烯亚胺一阿霉素皮下注射体内滞留实验第8章 附录8.1 常用仪器的使用说明8.1.1 移液枪8.1.2 气相色谱仪8.1.3 液相色谱仪8.1.4 紫外一可见分光光度计8.1.5 红外光谱仪8.1.6 荧光分光光度计8.1.7 PCR仪8.1.8 表面等离子共振生物传感实验仪8.1.9 蛋白质分离纯化系统8.1.1 0CHI电化学分析仪8.1.1 1高速冷冻离心机8.1.1 2COz培养箱8.1.1 3倒詈相差显微镜8.1.1 4酶标仪8.1.1 5活体荧光成像系统8.2 常用缓冲溶液的配制8.3 常用特殊化学生物学试剂的配制8.3.1 细胞培养液的配制8.3.2 Mrrr溶液的配制方法8.3.3 HE染色液的配制8.4 Linux操作系统的基本操作8.5 生物信息数据库
封面
书名:化学生物学实验
作者:曾秀琼，吴起主编
页数:201页
定价:¥49.0
出版社:科学出版社
出版日期:2013-01-01
ISBN:9787030365521
PDF电子书大小:64MB 高清扫描完整版