基因工程实验指导-(第3版)_PDF下载[71MB-百度云]朱旭芬

内容简介

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　　《基因工程实验指导（第3版）》以基因克隆为主线，实验内容涉及核酸的提取与检测，靶基因的获取，基因定点突变、沉默与敲除，质粒的重组，原核及真核表达系统的构建与表达，蛋白质分析与目标产物分离等。每个实验板块由导言、知识导图以及5～9个不同的实验组成，系统介绍了实验的相关基本原理，为同一实验项目提供了多种可供选择的实验方法，强调注意事项，并对实验相关的内容进行评议。第3版还着重扩充了基因工程领域的新技术和新发展。　　《基因工程实验指导（第3版）》提供了与教材相结合的教学课件、教学视频、彩图、拓展性阅读材料、实验仪器、操作要点图片、实验结果图片及实验报告范本等资源，便于教师教学和学生学习使用。　　《基因工程实验指导（第3版）》适用于高等学校生物技术、生物工程、生物科学等相关专业本科教学使用，也可供从事基因工程教学、科研、生产的工作人员和研究生参考。

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实验计划表导论**节基因工程的四大要素第二节基因克隆的策略1 核酸的提取与检测1-1 基因组DNA的提取1-2 总RNA和mRNA的提取1-3 噬菌体DNA的提取1-4 质粒DNA的提取1-5 核酸的检测1-6 脉冲场凝胶电泳1-7 宏基因组文库的构建2 靶基因的获取2-1 PCR扩增2-2 目的基因片段的获取2-3 探针的标记及检测2-4 核酸探针筛选基因文库2-5 反转录PCR2-6 RACE方法2-7 反向PCR2-8 SiteFinding-PCR2-9 功能基因的活性筛选3 基因定点突变、沉默与敲除3-1 基因定点突变3-2 基因沉默技术3-3 酵母基因的敲除3-4 哺乳动物基因的敲除3-5 植物基因的敲除4 质粒的重组4-1 T-A克隆4-2 感受态细胞的制备4-3 重组质粒的转化4-4 阳性克隆的筛选4-5 DNA序列测定与序列同源性分析5 原核表达系统的构建与诱导表达5-1 DNA的酶切反应5-2 靶DNA片段的分离纯化5-3 DNA片段的连接5-4 表达质粒的构建5-5 Soulhern印迹5-6 靶基因的诱导表达5-7 SDS-PAGE6 真核表达系统的构建与表达6-1 外源基因在酵母中的表达6-2 外源基因在哺乳动物细胞中的表达6-3 外源基因在植物细胞中的表达6-4 qRT-PCR分析6-5 Nor-thern印迹6-6 Western印迹6-7 荧光原位杂交7 蛋白质的分析与目标产物分离7-1 免疫荧光与激光共聚焦7-2 双向电泳7-3 酵母双杂交7-4 蛋白质浓度的测定7-5 亲和层析参考文献附录1 名词缩写附录2 实验操作及仪器使用注意事项附录3 如何撰写实验报告附录4 常用碱基、氨基酸符号及缓冲液附录5 大肠杆菌基因型附录6 实验仪器